学术评语及决议:
XXXX的博士学位论文以两株不同转移能力的肺癌细胞株95C和95D为研究对象,聚焦研究了肺癌细胞株中miRNA的筛选及miR-544a促进肺癌胞转移的机制。利用miRNAs芯片对95C和95D 的miRNA谱系分析筛选,发现miR-544a 在高转移肺癌细胞株95D中高表达,并通过QPCR进行验证;利用TargetScans数据库和双荧光素酶报告系统验证CDH1、GSK-3β是miR-544a的靶基因;采用细胞转染的方法,将miR-544a mimic转染到低转移肺癌细胞株95C中,进行Transwell侵袭实验、划痕实验、Western blot等实验检测转染细胞侵袭能力的变化以及CDH1、Vimentin等蛋白表达水平的变化,发现转染细胞侵袭能力增强、CDH1下调、Vimentin上调;将miR-544a的序列克隆到pBaBe-puro载体中,构建了能表达成熟miR-544a的载体,进而转染95C和95D,获得了稳定表达miR-544a的细胞系;进一步通过Western blot和肿瘤球悬浮培养实验研究miR-544a与肿瘤干细胞的关系,结果显示,95C、95D转染miR-544a后,GSK-3β表达降低,β-catenin和CD133表达增高,提示miR-544a通过下调CDH1和 GSK-3β,上调CD133,诱导细胞发生EMT,激活Wnt/β-catenin信号通路,促进细胞的侵袭和转移,使细胞形成肿瘤球,具有了肿瘤干细胞的特征。以上研究工作为肺癌的早期诊查和治疗提供了基础。
1、
研究论文《肺癌细胞株中miRNA的筛选及miR-544a促进肺癌细胞一的机制研究》以肺癌高/低侵袭性细胞株95D/95C为研究对象,筛选差异表达的miRNAs,研究并验证了miR-544a与肺癌细胞的侵袭转椅密切相关,可能机制是通过靶向沉默CDH1、GSK-3β等基因表达、促进肺癌细胞EMT发生及诱导干性增加等作用方式相关。该研究结果对筛选肺癌相关分子标志物,进一步研发靶向肺癌诊断或诊疗新产品奠定了一定的实验基础。该研究立题有一定新意,设计合理、方法科学,结果可信。论文撰写规范,达到博士学位论文水平。
2、本论文首先用高通量miRNA芯片检测发现,并用QPCR证实miR-544a在95D中高表达,而在95C中低表达,并进一步证明miR-544a与两株肿瘤细胞的侵袭和转移能力有关。在miR-544a作用机制探讨中,作者发现了miR-544a两个靶基因:CDH1和GSK-3β。作者在细胞水平上证明miR-544a可下调GSK-3β来激活Wnt/β-catenin信号通路,上调CD133并使细胞形成肿瘤球。论文立题新颖,有创新性,同时这些工作具有重要的理论价值和指导意义。该学生查阅了丰富的文献,利用分子生物学、细胞培养和生化检测手段获得了明确的结果,并形成了一本简洁、明了的论文,已成为一名优秀的博士毕业生。
3、该博士学位论文选题属学科前沿。该项目研究可为肺癌诊断和治疗提供新的靶点,具有重要的理论意义和潜在的临床应用价值。该论文彩页研究方法先进,技术路线合理,取得了创新性实验成果;论文结构合理,层次分明,数据可信,结论恰当,图表及参考文献规范,标明论文作者掌握了本学科坚实宽广的基础理论和系统深入的专业知识,举办独立从事科研工作的能力。该论文达到博士学位论文水平。
以上是盲评意见
方向往儿童白血病上靠
科研立项
国家青年基金吗?
miRNA 老鼠模型
该课题共分为2个部分。第一部分筛选了SD大鼠,制备了DPB动物模型,提取肺组织,采用miRNA芯片技术,对6例实验组、4例对照组SD大鼠肺组织进行了 miRNA表达谱的分析。筛选出了11个DPB动物肺组织中成差异性表达的miRNA,所筛选的miRNA可区分对照肺组织和DPB肺组织。该部分研究技术资料完整,国内核心期刊发表论文2篇。研究内容丰富了DPB的基础研究内容。
第二部分的研究未能完成。
建议延期结题,完成原定的对SD大鼠DPB动物模型中肺组织中特异性miRNA的鉴定。